AAT Bioquest  22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒*針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*

我們北京云肽生物科技有限公司作為伯樂(lè)AAT Bioquest公司的經(jīng)銷(xiāo)商為客戶提供，正規(guī)進(jìn)口，保證原裝正品，貨期穩(wěn)定，折扣好的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

AAT Bioquest 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)-常備現(xiàn)貨

美國(guó) AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest，Inc.)是一家為從事生命科學(xué)研究、診斷研發(fā)及藥物開(kāi)發(fā)的科學(xué)家研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售生物分析研究試劑和試劑盒的公司。公司致力于光譜學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，包括吸收（顏色），熒光和發(fā)光技術(shù)。AATBioquest 的產(chǎn)品幫助 quan shi jie 的科學(xué)家和生物醫(yī)藥研究者更好的了解生物化學(xué)，免疫學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等領(lǐng)域。AAT Bioquest 會(huì)不斷介紹新產(chǎn)品，快速的豐富各個(gè)領(lǐng)域的產(chǎn)品。

AAT Bioquest  22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒*針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*  100Tests，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：AAT Bioquest

產(chǎn)品貨號(hào)：22970

產(chǎn)品名稱(chēng)：Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒*針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*

產(chǎn)品規(guī)格：100Tests

AAT Bioquest 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)-常備現(xiàn)貨 

AAT Bioquest  22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒*針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*  100Tests，產(chǎn)品說(shuō)明：

線粒體是細(xì)胞超氧化物的主要生產(chǎn)者。產(chǎn)生低至中等水平的超氧化物對(duì)于正確調(diào)節(jié)許多基本細(xì)胞過(guò)程至關(guān)重要，包括基因表達(dá)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和肌肉對(duì)耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練的適應(yīng)。不受控制的線粒體超氧化物產(chǎn)生會(huì)引發(fā)細(xì)胞氧化損傷，從而導(dǎo)致多種疾病的發(fā)病機(jī)制，包括癌癥、心血管疾病、神經(jīng)退行性疾病和衰老。因此，細(xì)胞內(nèi)線粒體超氧化物的檢測(cè)對(duì)于了解適當(dāng)?shù)募?xì)胞氧化還原調(diào)節(jié)及其失調(diào)對(duì)各種病理的影響至關(guān)重要。細(xì)胞計(jì)™熒光線粒體超氧化物活性測(cè)定試劑盒使用我們 du te 的超氧化物指示劑來(lái)量化活細(xì)胞中的超氧化物水平。MitoROS™ 580是活細(xì)胞通透性的，可以快速，選擇性地靶向線粒體中的超氧化物。當(dāng)它與超氧化物反應(yīng)時(shí)會(huì)產(chǎn)生紅色熒光。細(xì)胞計(jì)™熒光法細(xì)胞內(nèi)超氧化物檢測(cè)試劑盒提供靈敏的一步熒光測(cè)定，可在孵育一小時(shí)后檢測(cè)活細(xì)胞中的線粒體超氧化物。該試劑盒針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用進(jìn)行了優(yōu)化。

組件

組件 A：MitoROS™ 580—1瓶

組分B：檢測(cè)緩沖液—1 瓶 （10 mL）

組件C：DMSO—1 瓶 （100 μL）

1.    制備密度為 0.5 - 1 × 10 的細(xì)胞6細(xì)胞/毫升

2.    用測(cè)試化合物處理細(xì)胞以誘導(dǎo)超氧化物

3.    將 1 μL 500X MitoROS™ 580 加入 0.5 mL 細(xì)胞懸液中

4.    將細(xì)胞在 37°C 下染色 1 小時(shí)

5.    使用帶FL2通道的流式細(xì)胞儀監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度

重要說(shuō)明：在開(kāi)始實(shí)驗(yàn)之前，請(qǐng)?jiān)谑覝叵陆鈨鏊薪M分。

儲(chǔ)備液的制備

除非另有說(shuō)明，否則所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。

1. MitoROS 580儲(chǔ)備溶液（500X）：

將100μLDMSO（組分C）加入MitoROS 580（組分A）的小瓶中，混合均勻，制成500X MitoROS™™™ 580儲(chǔ)備溶液。避光。注意：儲(chǔ)存時(shí)，請(qǐng)密封管子。

實(shí)驗(yàn)方案樣本

1.    對(duì)于每個(gè)樣品，在您選擇的 0.5 mL 生長(zhǎng)培養(yǎng)基或緩沖液中制備細(xì)胞，密度為 5×10⁵至 1×10⁶細(xì)胞/毫升。注意：應(yīng)單獨(dú)評(píng)估每個(gè)細(xì)胞系，以確定超氧化物誘導(dǎo)的最佳細(xì)胞密度。

2.    在檢測(cè)緩沖液（組分 B）或所需緩沖液（如 PBS）中用 25 μL 20X 測(cè)試化合物處理細(xì)胞以誘導(dǎo)超氧化物。對(duì)于對(duì)照細(xì)胞（未處理的細(xì)胞），加入相應(yīng)量的復(fù)合緩沖液。

3.    將細(xì)胞在37°C下孵育至少30分鐘或所需的時(shí)間，避光。注意：用50μM 抗 霉 su A（AMA）在37°C下處理Jurkat細(xì)胞30分鐘以誘導(dǎo)超氧化物。有關(guān)詳細(xì)信息，請(qǐng)參見(jiàn)圖 1?；摶ㄇ嗨兀?span>50μM）或H₂O₂（1 mM） 也可用于誘導(dǎo)超氧化物。

4.    將 1 μL 500X MitoROS™ 580 儲(chǔ)備溶液加入 0.5 mL 細(xì)胞懸液中。

5.    在 37°C 下孵育 1 小時(shí)。注意：對(duì)于貼壁細(xì)胞，用0.5 mM EDTA輕輕提起細(xì)胞以保持細(xì)胞完整，并在用MitoROS™ 580孵育之前用含血清的培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞一次。適當(dāng)?shù)姆跤龝r(shí)間取決于所使用的單個(gè)細(xì)胞類(lèi)型和測(cè)試化合物。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。

6.    使用具有FL2通道的流式細(xì)胞儀（Ex / Em = 488 / 590 nm）監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度。對(duì)感興趣的細(xì)胞進(jìn)行門(mén)控，不包括碎片。

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

22970  Cell Meter™ 熒光線粒體超氧化物活性檢測(cè)試劑盒*針對(duì)流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行了優(yōu)化*  100Tests